Universidade estadual de campinas
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Identificação dos epítopos de proteínas recombinantes do vírus da tristeza dos citros reconhecidos por anticorpos monoclonaisMárcio Lorencini (Bolsista FAPESP) e Profa. Dra. Dagmar Ruth Stach-Machado (Orientadora), Instituto de Biologia - IB, UNICAMP Perdas significativas em plantações citrícolas decorrem da ação de um patógeno distribuído em diversas regiões do mundo, o vírus da tristeza dos citros (CTV). Uma eficiente detecção do CTV é necessária para a adoção de medidas de controle adequadas. Para um imunodiagnóstico mais rápido e seguro, este projeto visa caracterizar os epítopos de proteínas de isolados brasileiros do CTV reconhecidos por quatro anticorpos monoclonais. A metodologia proposta baseia-se no tratamento de proteínas recombinantes do capsídeo viral com enzimas proteolíticas para um ensaio posterior de reconhecimento com os anticorpos monoclonais. A identificação dos epítopos é feita através da espectrometria de massa. Os resultados até então obtidos referem-se à purificação satisfatória de proteínas recombinantes e anticorpos monoclonais, além da confirmação do padrão de reconhecimento específico dos anticorpos por ELISA. Quanto à identificação dos epítopos, os primeiros ensaios de digestão da proteína CB-22 com tripsina revelaram uma provável interação do anticorpo 30.E.09 com um peptídeo de aproximadamente 1846 Da. Um maior detalhamento das regiões de interação entre os anticorpos monoclonais e as proteínas do capsídeo viral será possível após a conclusão dos experimentos com as demais enzimas proteolíticas. Vírus da tristeza dos citros (CTV) - Epítopo - Espectrometria de massa B144
Estudo da expressão da enzima óxido nítrico sintase iNOS na fase inicial da doença periodontal induzida, sob influência da nicotinaTaís Nitsch Mazzola (Bolsista FAPESP) e Profa. Dra. Dagmar Ruth Stach-Machado (Orientadora), Instituto de Biologia - IB, UNICAMP A doença periodontal promove a destruição progressiva dos tecidos periodontais, através de uma resposta inflamatória crônica à placa bacteriana, induzindo a migração e ativação de células, expressão de citocinas e síntese de óxido nítrico (NO), gerado pela enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS). O consumo de nicotina no tabaco constitui um fator de risco para a progressão e severidade da doença. O objetivo deste trabalho foi estudar a expressão de iNOS através de imunohistoquímica, avaliando a ação da nicotina no periodonto de ratos, após 3, 5 e 7 dias da indução da doença pela inserção de uma ligadura ao redor do primeiro molar do animal. O grupo I recebeu diariamente 2l/g de peso de solução salina via intraperitoneal, o grupo II, 2l/g de peso de solução de nicotina 0,365 g/L, sendo que ambos não receberam a ligadura; o grupo III, 2l/g de peso de solução salina e o grupo IV, 2l/g de peso de solução de nicotina 0,365 g/L, e estes dois últimos receberam a ligadura. Através de coloração de rotina com HE, uma inflamação crescente com desorganização do tecido conjuntivo da mucosa oral foi observada nos grupos III e IV. A contagem das células positivas na imunohistoquímica (células endoteliais ou com características macrofágicas) indicou um aumento gradual na expressão da enzima iNOS. Doença periodontal - Óxido nítrico sintase - Nicotina B145
ANÁLISE DE BIOMARCADORES DE ESTRESSE OXIDATIVO EM JOGADORES DE FUTEBOLFernando Oliveira Catanho da Silva (Bolsista PIBIC/CNPq) e Profa. Dra. Denise Vaz de Macedo (Orientadora), Instituto de Biologia-IB, UNICAMP O futebol caracteriza-se como uma atividade intermitente, alternando atividades em alta intensidade com períodos em baixa intensidade, exigindo níveis elevados de performance física. O propósito deste trabalho foi monitorar a intensidade de treinamento durante o período preparatório para o Campeonato Paulista de Futebol Sub-20, através de marcadores de estresse oxidativo e metabólico e danos musculares, com o propósito de estabelecer o limiar de estresse individual, além de parâmetros de performance, como a velocidade máxima, o número de sprints e o limiar anaeróbio. Onze jogadores juniores (categoria sub-20) foram analisados em quatro momentos distintos do período preparatório. Os biomarcadores sanguíneos analisados foram: atividade enzimática antioxidante em hemácias (Catalase e Glutationa Redutase), produtos plasmáticos da oxidação de lipídios e proteínas (TBARS e Proteínas Carboniladas), concentração plasmática de uréia e creatinina como marcadores de estresse metabólico e atividade plasmática da creatina quinase refletindo alterações musculares. O limiar anaeróbio foi medido pelo protocolo de Tegtbur e para individualizar as respostas relacionadas à velocidade máxima e ao número de sprint, utilizamos o seguinte protocolo: cada atleta executou sprints de 30m, com 20 segundos de pausa entre os sprints, até alcançar um decréscimo de 10% na velocidade máxima, utilizando-se de cinco fotocélulas dispostas a cada 7,5m. Nossos resultados mostram que a equipe obteve resultados muito homogêneos dos marcadores bioquímicos durante o período preparatório, além de uma melhora nos parâmetros de performance analisados. Estresse Oxidativo – Futebol – Capacidades Físicas B146
ANÁLISE DA DETERMINAÇÃO DE LIMIAR ANAERÓBICO, RESISTÊNCIAS DE “SPRINT” E DE SALTO VERTICAL EM ATLETAS DE BASQUETEBOLLucas Samuel Tessutti (Bolsista PIBIC/CNPq) e Profa. Dra. Denise Vaz de Macedo (Orientadora), Instituto de Biologia – IB, UNICAMP O perfil da modalidade basquetebol apresenta um ritmo muito variado em suas intensidades de esforço. Devido ao pequeno espaço, visto em relação ao futebol, os esforços de curta duração são constantemente visualizados, sendo caracterizados por uma combinação força-velocidade. Arranques rápidos, paradas bruscas e crescimentos de precisão nos arremessos são as principais capacidades exigidas, tendo como fonte de energia um predominante envolvimento do metabolismo glicolítico. O desenvolvimento de outras capacidades como resistência aeróbia, força, velocidade, flexibilidade e coordenação também são consideradas bastante significativas na preparação destes atletas. Nosso objetivo neste estudo é auxiliar a comissão técnica da equipe (11 atletas) de basquetebol masculino, categoria juvenil (Sub 20) do Clube Jundiaiense na temporada 2003, realizando testes de limiar anaeróbio (técnica espirométrica com velocidade programada em esteira), resistência de “sprint” (protocolo Labex-Test, desenvolvido pelo Labex) e altura de salto vertical (proposto por Bosco, 1990). Os níveis de capacidade aeróbia, velocidade máxima e resistência de “sprint” permanecem menores que os visualizados em jogadores de futebol, porém a capacidade de saltabilidade é evidentemente maior nos atletas de basquetebol. Basquetebol - Capacidades Físicas - Força-Velocidade B147
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