3.4In vitro testování odezvy pacientů na změnu koncentrace ASA
Jelikož genetická predispozice v polymorfismu destičkového receptoru COX–1 není jediná příčina rezistence, hledali jsme vyšetření, které by pomohlo odhalit nedůslednost pacienta při užívání léčiva nebo problémy spojené se vstřebáváním účinné látky. Základ tvořily pilotní poznatky získané z měření vlivu ASA in vitro. Pro měření byli vyhledáni pacienti, kteří neodpovídali na protidestičkovou léčbu. Vzorky jejich krve byly inkubovány s příslušným množstvím ASA (18,2 mg/ml ředěné 1:2, 1:4, 1:8 a 1:16 roztokem NaCl) po dobu 5 minut. Následně byla detekována změna agregační schopnosti po přidání kyseliny arachidonové na přístroji Multiplate. Výsledná data prokazují, že řada pacientů při testech in vitro odpovídá na léčbu (Tab. 11).
Tab. 11. Vliv množství ASA na agregační schopnost destiček in vitro
Ročník
|
Hodnota agregace (AUC) při denní dávce ASA
|
500 mg
|
250 mg
|
100 mg
|
50 mg
|
25 mg
|
12,5 mg
|
6,25 mg
|
0 mg
|
1965
|
|
|
146
|
147
|
163
|
169
|
189
|
220
|
1966
|
|
|
115
|
131
|
216
|
284
|
360
|
342
|
1949
|
|
|
135
|
139
|
348
|
450
|
422
|
462
|
1974
|
|
|
79
|
114
|
104
|
226
|
257
|
320
|
1938
|
202
|
241
|
597
|
543
|
669
|
592
|
560
|
668
|
1966
|
|
|
157
|
151
|
130
|
121
|
123
|
115
|
1940
|
|
|
44
|
158
|
164
|
169
|
170
|
175
|
1929
|
|
|
188
|
158
|
212
|
190
|
175
|
204
|
1992
|
|
|
4
|
198
|
151
|
184
|
218
|
224
|
1943
|
|
|
112
|
194
|
181
|
411
|
368
|
529
|
1949
|
|
|
52
|
10
|
92
|
275
|
421
|
530
|
Prostřednictvím této metody lze vyloučit poruchu destičkového receptoru, a tím odhalit nepravidelný příjem léčiva či poruchu vstřebávání. U většiny pacientů byla detekována dostatečná odpověď na přítomnost ASA. V jednom případě je však patrná změna aktivace destičky až při velmi vysoké dávce ASA (Obr. 20), kterou nelze fyziologicky dosáhnout. Zde lze usuzovat endogenní příčiny selhání protidestičkové terapie a je nutné změnit léčbu.
Obr. 20. Stanovení in vitro inhibiční koncentrace ASA u pacientů neodpovídajících na léčbu
|