Detekce příčin rezistence protidestičkové léčby u rizikových pacientů diplomová práce autor: Bc. Terezie Haitlová

Tato diplomová práce se zabývá zjišťováním příčin selhání protidestičkové léčby pomocí měření agregace krevních destiček v porovnání s výskytem polymorfismu destičkového receptoru COX–1.

Teoretická část diplomové práce pojednává o základních fyziologických funkcích krevních destiček a jejich významu pro protidestičkovou léčbu. Krevní destičky mají přímý vliv na vznik a rozvoj kardiovaskulárních onemocnění, které se často manifestují ve formě akutního infarktu myokardu. Toto onemocnění je ve vyspělých zemích jednou z hlavních příčin morbidity a mortality. V České republice je úmrtnost na kardiovaskulární choroby jednou z nejvyšších na světě a přibližuje se k 53 % všech úmrtí v posledním desetiletí. Zvláštní důraz v prevenci manifestace onemocnění je kladen na schopnost potlačení agregace destiček při poškození cévní stěny, kdy dochází k aktivaci hemokoagulace. Teoretická část popisuje prevenci vzniku krevních sraženin na základě účinku protidestičkové léčby (ASA), která má za úkol inhibovat agregaci.

Experimentální část se věnuje studiu účinnosti protidestičkové léčby prostřednictvím měření agregace krevních destiček z plné krve na přístroji Multiplate. Tato impedanční metoda byla optimalizována. Pro měření byl vybrán vhodný induktor pro aktivaci agregace krevních destiček. Následně byla stanovena in vitro inhibiční aktivita kyseliny acetylsalicylové, která byla aplikována pro odlišení endogenních a exogenních příčin selhávání protidestičkové léčby. V neposlední řadě byla zjišťována frekvence výskytu polymorfismu destičkového receptoru COX–1 (– 842A > G) jako genetické příčiny rezistence na léčbu ASA s využitím molekulárně-genetické techniky RT PCR v podobě HRM. Tato metoda byla optimalizována. Poté byla využita pro zjištění frekvence výskytu polymorfismu na skupině 90 pacientů s akutním koronárním syndromem.

This thesis is concerned with detecting the causes of failure of antiplatelet therapy by measurement of platelet aggregation in coparaison compared with the occurrence of platelet receptor polymorphism of COX-1.

The theoretical part of the thesis deals with the basic physiological functions of platelets and their importance for the antiplatelet therapy. The platelets have a direct impact on formation and development of the cardiovascular diseases which often manifest in the form of the acute myocardial infarction. In developed countries, this disease is a major cause of morbidity and mortality. In the Czech republic, the mortality of cardiovascular diseases is one of the highest in the world and it is approaching 53 % of all the deaths in the last decade. The particular emphasis in the prevention of disease manifestation is put on the ability to suppress platelet aggregation in vessel wall damage, which causes the activation of coagulation. The theoretical part describes prevention of blood clots formation based on the effect of antiplatelet therapy (ASA) which is designed to inhibit aggregation.

The experimental part is devoted to study of antiplatelet therapy effectiveness by measuring the whole blood platelets aggregation on the Multiplate device. This impedance method has been optimized. The appropriate inducer for activation of platelet aggregation was chosen for measurement. Subsequently, the inhibitive activity of acetylsalicylic acid was determined in vitro, which was applied to distinguish endogenous and exogenous causes of antiplatelet therapy failure. In addition, the frequency of polymorphism of platelet receptor COX- 1(– 842A > G) occurrence as a genetic cause of resistance to ASA therapy using molecular genetic techniques RT PCR in the form of HRM was determined. This method has been optimized. Later, it was used for determination of polymorphism occurrence frequency in a group of 90 patients with acute coronary syndrome.