Ana səhifə

Lycium barbarum увеличивает калорийность расходы и уменьшает окружность талии у здоровых полных мужчин и женщин: пилотное исследование


Yüklə 1.32 Mb.
səhifə3/48
tarix25.06.2016
ölçüsü1.32 Mb.
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   48

3. Результаты

3.1. Влияние Таурина и LB выписки на жизнеспособность клеток в ARPE-19 клетки Культивировали в глюкоза в норме состояние


Чтобы определить, является ли LB экстракт и компонент таурин повлияли на жизнеспособность в глюкоза в норме-лечить ARPE-19 клеток, МТС анализа была выполнена в течение 24 ч, 48 ч и 72 ч инкубации. Инкубация LB экстракт 0.001, 0.01, 0.1, 0.5, 1 и мг/мл, глюкоза в норме-лечить APRE-19 клеток в течение 24 ч и 48 ч было мало, или нет цитотоксичности (>90% жизнеспособность остался). На 5 мг/мл, LB экстракт цитотоксических на всех инкубации раз (Рис. 1(а)).

3.2. Цитопротективные эффекты Таурина и LB экстракт в ARPE-19 клеток, подвергающихся высоким глюкозы


Как установлено, что гипергликемия индуцирует клеточную гибель эпителиальных клеток сетчатки [37], ARPE-19 клетки были обработаны 33.3 мм глюкозы 48 ч в присутствии LB экстракт (0.1, 0.5 и 0.75 мг/мл) или таурин (0.001, 0.1, 1 и мм), и их цитопротекторный эффект был осмотрен МТС анализа. Поскольку высокий уровень глюкозы увеличивается осмолярность, ARPE-19 клеток были также подвержены осмотическое управления (27.5 мм маннитол + 5.5 мм глюкозы). Жизнеспособность клеток в 33,3 мм глюкозы достоверно уменьшился на 59,9%; потери жизнеспособности и было отменено, добавив LB экстракт доза-зависимым образом (на 67,9, 74.4,, 81,0%, соответственно.) (Рис. 2.). Также жизнеспособность клеток в 33,3 мм глюкозы условие было отменено путем добавления таурина в зависимости от дозы образом (69.4, 82.6, и на 89,3%, соответственно.) (Рис. 2.). Потеря жизнеспособности клеток в высокой глюкозы культуры было аналогично восстанавливаются путем добавления положительного контроля RG (на 73,8%) и PG (89.1%). Осмотическое контроль не выявил значительное снижение жизнеспособности клеток.

3.3. Влияние Таурина и LB выписки на Апоптоз клеток в высокой глюкозы-лечение ARPE-19 клеток


Для исследования того, цитопротективные эффекты LB экстракт и таурин были из-за ослабления высокого глюкозы-индуцированного апоптоза, характерный морфологический окрашивание проводили с помощью Hoechst 33342 и проточной цитометрии с Аннексин V/PI двойное окрашивание для выявления и количественной оценки апоптоза клеток.

Инкубации с высокой гликемии в течение 48 h индуцирует значительное увеличение количества апоптотических клеток (26,8% от общей клетки), как это определено окрашивание Hoechst, по сравнению с нормальной глюкозы культуры (Рис. 3(a)). Ингибиторный эффект LB и экстракт таурина на высокой глюкозы-индуцированного апоптоза была продемонстрирована в характерных морфологических окрашивание (Рис. 3(б)). Лечение с LB экстракт (0.1, 0.5 и 0.75 мг/мл) доза зависимо уменьшилось количество апоптотических клеток на 18,3, 15.0 и 8,7% общего объема клетки, соответственно, по сравнению с высоким контролем уровня глюкозы в крови, достигая значений, сопоставимых с таковыми в контрольной культур (5.2% общего объема клетки) (Рис. 3(a)). Таурин (0.001, 0.1, 1 и мм) доза зависимо уменьшилось количество апоптотических клеток, 14,0, 12.0, и 8,6% общего объема клетки, соответственно, по сравнению с высоким контролем уровня глюкозы в крови, приближаясь к значениям в контрольной культур (5.2% общего объема клетки) (Рис. 3(a)). Количество апоптотических клеток, как это определено окрашивание Hoechst в высокого глюкозы состояние было аналогично снизились на положительные элементы управления RG (9,4%) и PG (7.6%).

Чтобы определить, является ли LB и экстракт таурина сократился апоптоза в высоком глюкозо-индуцированной ARPE-19 клеток, апоптоз измеряется как Аннексин V обязательными для позитивных клеток и количественно методом проточной цитометрии, как Аннексин V привязке специально для PS, позволяя дискриминации между жизнеспособным и апоптотических клеток [38]. Представитель dotplots контроля и лечить высокое-глюкозо-индуцированной ARPE-19 клеток окрашивали Аннексина V и PI используется для определения уровня апоптоза представлены в Рис. 4(б). LB экстракт (0.1, 0.5 и 0.75 мг/мл) доза зависимо уменьшилось количество Аннексин-V позитивных клеток (14.8, 10.2, и 6,4% - контроль) (Рис. 4(а)). Таурин в дозе зависимо уменьшилось количество Аннексин V-положительных клеток (14.8, 9.3, и 6.0% в контроле) (Рис. 4(а)). Количество апоптотических клеток в высокой глюкозы культуры была уменьшена путем добавления положительного контроля, RG (на 10,0%) и PG (6.1%). Осмотическое управления не повышение апоптотической гибели клеток, исключающие участие осмотического влияния высокой концентрации глюкозы.


Таурин (0.001, 0.1, 1 и мм) дозы в зависимости от указанных каспазы-3 экспрессии белка (на 7,0-, 5.2-и 3,3 раза, соответственно.) (Рис. 5(б)).

Уровни протеина каспазы-3 в high-глюкоза-обработанных клетках были снижены путем добавления положительного контроля, RG (в 4,4 раза) и PG (в 4,3 раза). Осмотическое управления не повысить активность каспазы-3 уровня белка, исключающие участие осмотического влияния высокой концентрации глюкозы.


3.5. Влияние Таурина и LB выписки на Каспазу-3 деятельность в высшей глюкозо-Индуцированной ARPE-19 клеток


Для подтверждения выводов downregulating эффект LB и экстракт таурина на апоптоза, активации каспазы-3 в апоптотических клеток определяли с помощью флюориметрического исследования ферментов. LB экстракт (0.1, 0.5 и 0.75 мг/мл) дозы в зависимости от указанных каспазы-3 активность (на 5,0-, в 4,2 и 3,9 раза, соответственно.) (Рис. 6.).

Таурин (0.001, 0.1, 1 и мм) дозы в зависимости от указанных каспазы-3 активность (на 5,7-, в 4,2 и 3,1 раза, соответственно.) (Рис. 6.).

Активированную каспазу-3, уровни высокого глюкозы состоянии были отменены путем добавления положительного контроля, RG (в 2,8 раза) и PG (в 3.1 раза). Повышением осмотического управления не повысить активность каспазы-3 деятельности, исключающие участие осмотического влияния высокой концентрации глюкозы.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   48


Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©atelim.com 2016
rəhbərliyinə müraciət